北京市2012年度激光共聚焦掃描顯微學最新進展學術研討會順利舉行

　　2012年3月27日，為推動北京市及周邊省市激光共焦掃描顯微學的進步和發(fā)展，提高廣大相關工作者的學術及技術水平，促進激光共焦掃描顯微學在生命科學等領域中的應用和發(fā)展，北京理化分析測試技術學會和北京市電鏡學會在北科大廈成功舉辦了“北京市2012年度激光聚焦掃描顯微學最新進展學術研討會”。來自高校、科研院所、企業(yè)的100余名專家學者參加了本次會議。

　　會議現場

　　軍事醫(yī)學科學研究院張德添教授

　　北京大學醫(yī)學部生物醫(yī)學分析中心何其華高工

　　會議由軍事醫(yī)學科學研究院張德添教授，北京大學醫(yī)學部生物醫(yī)學分析中心何其華高工主持。

　　Cdc42在小鼠卵母細胞減數分裂成熟中的作用

　　中國科學院動物研究所孫青原研究員

　　孫青原研究員現任中國科學院動物研究所計劃生育生殖生物學國家重點實驗室主任，他在報告中介紹了利用ZeissLSM710激光共聚焦顯微鏡、珀金埃爾默UltraVIEWVOX活細胞實時成像系統(tǒng)等儀器研究Cdc42在小鼠卵母細胞減數分裂成熟中的作用，Cdc42作為一種細胞骨架和細胞極化的重要調節(jié)物，在減數分裂和卵母細胞成熟過程中有重要的作用。

　　毫米級多光子顯微鏡熒光成像

　　奧林巴斯(中國)有限公司位鵬先生

　　采集更明亮和更清晰地標本深層圖像，對于更好的開展生命科學研究工作來說十分重要。位鵬先生介紹了奧林巴斯在這方面所能提供的解決方案：利用日本理學院Miyawaki博士研發(fā)的組織、器官透明液處理小鼠大腦樣本，結合奧林巴斯的XLPLN25×SVMP鏡頭可以觀察到深度達4mm處的深層圖像。目前奧林巴斯還推出了一款新型的鏡頭，觀察深度可達8mm，不過還未正式推向市場，可接受定制。

　　超高分辨率顯微鏡技術

　　中國顯微圖像網秦靜女士

　　在生命科學研究中科學家總希望看到更加細微的結構，從細胞到細胞器、再到蛋白質等生物大分子，這些結構的尺度都在納米量級遠遠超出了常規(guī)的光學顯微鏡的分辨極限，電子顯微鏡雖然能提供納米級的分辨率，但不適合觀察活細胞，為了解決這一難題，超高分辨顯微鏡技術應時而生。在報告中秦靜女士詳細介紹了四種基于不同原理的超高分辨顯微鏡：4Pi顯微鏡、STED(受激發(fā)射損耗顯微鏡)、PALM(光激活定位顯微鏡)、STORM(隨機光學重建顯微束)，并分析了各類顯微鏡的性能及優(yōu)缺點。

　　多光子技術的新進展

　　徠卡儀器有限公司王怡凈博士

　　王怡凈博士從單分子探測(SMD)、相干反斯托克斯拉曼散射(CARS)、光參量振蕩器(OPO)等三個方面介紹了多光子技術的最新進展。王怡凈博士介紹說如果想觀察分子的運動或分子的識別，采用普通的共聚焦技術就比較困難，所以單分子探測技術就應用而生。相干反斯托克斯拉曼散射技術是一種基于分子固有的振動特性的觀察方法，樣品無需進行熒光標記，避免了熒光漂白等問題，該技術是由華裔科學家謝曉亮發(fā)明，徠卡公司購買了該技術并將其產品化。光參量振蕩器是一種新型紅外激光器，它的激發(fā)波長可以達到1300nm，由于激發(fā)波長變長，因而散射更小，觀測深度更深、對樣品損傷更小。

　　現代熒光顯微鏡學在生命科學中的應用

　　蔡司光學儀器(上海)國際貿易有限公司張寧博士

　　張寧博士介紹了在生命科學研究中，不同的樣品分析對于儀器的靈活性、觀察深度、掃描速度，以及分辨率等都有不同的需求，蔡司根據不同的需求能夠提供相應的儀器：如果對深度要求比較高，可以選擇多光子顯微鏡;如果要進行瞬態(tài)分析，可以選擇轉盤式共聚焦顯微鏡、純內反射熒光顯微鏡等;如果對分辨率要求非常高，可以選擇光活化定位系統(tǒng)、結構光學照明系統(tǒng)等。此外，張寧博士還介紹了蔡司最新的780點掃描激光共聚焦系統(tǒng)，以及在2011年7月蔡司將光學顯微鏡部門和電鏡部門進行了整合。

　　激光共聚焦掃描技術在神經發(fā)育中的作用研究

　　北京大學醫(yī)學部王韻博士

　　神經系統(tǒng)是機體最重要、最復雜的系統(tǒng)。王韻博士在報告中介紹了激光共聚焦掃描顯微技術在神經細胞增殖和分化中的應用；胚胎電轉結合Confocal技術觀察神經細胞的遷移；利用Confocal技術研究神經元極性、觀察軸突導向；利用雙光子Confocal技術觀察培養(yǎng)的海馬腦片中單個樹突棘長時程結構可塑性改變時分子激活的時空變化、觀察活體動物皮層神經元樹突棘隨外界刺激而出現的數目消長等。

　　Volocity——3D活細胞時代的成像分析軟件

　　珀金埃爾默儀器(上海)有限公司公司焦磊博士

　　焦磊博士介紹了珀金埃爾默推出的Volocity細胞三維結構分析軟件，該軟件包括多個功能模塊，用戶可以在同一軟件環(huán)境下完成圖像獲取、分析和數據發(fā)表的全過程。Volocity軟件的Acquisition模塊可以實現多通道、多位點3D圖像的精確定位和自動實時采集;Visualization模塊可為用戶提供多種圖像展現方式，用戶可以在高分辨率、完全交互的3D模式下實時解決樣品構造;Quantitation模塊提供了豐富的工具可以在3D模式下對物體進行測量、分析和跟蹤描繪;Restoration模塊設計用于三維或四維圖像的反卷積計算，以提高圖像的分辨率。

　　超高分辨率顯微鏡的引進與發(fā)展態(tài)勢分析

　　中科院生物物理所紀偉博士

　　紀偉博士介紹了目前不同的提高分辨率的成像方法的原理及其分辨能力，以及各種方法對樣品制備的要求和在實際應用當中的優(yōu)劣勢。采用光敏定位技術的超分辨率顯微鏡采用大功率激光器和快速采樣EMCCD，可以很好的觀察活細胞;利用片層光掃描結合光敏定位成像技術可以觀察厚樣品;具有更高的分辨率，可以研究百nm尺度的細胞器細節(jié)結構。最后紀偉博士總結說，更高的分辨率、更快的分析速度以便觀察活細胞、以及與其他技術的融合：如TIRF-STED、PALM-EM、STED-AFM、FCS-STED、STORM-AFM等。

　　會議中，與會人員同專家及企業(yè)人員進行了充分的互動和交流，通過會議大家對于激光共聚焦掃描顯微技術的最新進展有了更多的認識和了解。